一、    实验方法原理

       Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。

       与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。

       经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

二、    实验材料

       蛋白质样品

三、    试剂、试剂盒

       丙烯酰胺、SDS、Tris-HCL、β-巯基乙醇、ddH2O、甘氨酸、Tris、甲醇、PBS、NaCl、KCL、Na2HPO4、KH2PO4、考马斯亮蓝、乙醇、脱脂奶粉、硫酸镍胺、H2O2、DAB、试剂盒

四、    仪器、耗材

       电泳仪、电泳槽、离心机、离心管、硝酸纤维素墨、匀浆器、剪刀、移液枪、刮棒

五、    收费情况

       每张膜可做1-2个目的蛋白和相应内参蛋白，每张膜可做8个样品，每张膜制作费用报价为人民币1500元，不足一张按一张膜收费，一抗费用另计。一抗订购周期为3-4周。